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西城蚜虫吸植物韧皮部汁液-昆虫观察显微镜

作者: 发布时间:2022-07-02 20:47:58点击:1384

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大家好,这里是老上光显微镜知识课堂,在这里你可以学到所有关于显微镜知识,好的,请看下面文章:蚜虫吸植物韧皮部汁液-昆虫观

大家好,这里是老上光显微镜知识课堂,在这里你可以学到所有关于显微镜知识,好的,请看下面文章:
蚜虫吸植物韧皮部汁液-昆虫观察显微镜


蚜虫是常见的农业害虫,以吸食植物韧皮部汁液维生,体内含有内共生菌Buchnera aphidicola,
两者为的互利共生关系。Buchnera会提供宿主蚜虫色胺酸(tryptophan)和苯丙胺酸(phenylalanine)
两种芳香族胺基酸。3-deoxy-D-arabino- heptulosonate-7-phosphate synthase (DAHPS) 
为芳香族胺基酸合成路径所需要的酵素,aroH 为Buchnera DAHPS 的编码基因。Buchnera aroH 
缺乏转录及转译层级的调控,

其异位调控推测区和其他细菌没有完全保守,且因为Buchnera基因的表现不需要随生长环境的变化而改变,
是故认为Buchnera DAHPS可能不受回馈调控。由于Buchnera 无法在蚜虫体外进行一般细菌培养实验,


研究的目的在于建立E. coli 表现系统,来研究Buchnera DAHPS 酵素功能及回馈调控。实验结果得知,
Buchnera DAHPS 可以补偿大肠杆菌芳香族胺基酸突变株的营养缺失,测得Buchnera DAHPS对受质PEP及E4P的Km分
别为176 μM及290 μM,会受到最终产物tryptophan与phenylalanine的部份抑制,I0.5分别为19.7 μM
与168.4 μM,更大抑制百分比为61.7%与72.1%。进一步利用overlap-extension PCR建立带有T7 promoter 
的表现载体,转型到大肠杆菌BL21 (DE3) T7 系统,虽然可以大量表现Buchnera DAHPS,
但表现蛋白出现在不可溶的部份,尝试低温诱导、共同表现及重新折叠,
仍无法改善其错误折叠及稳定使其恢复活性
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