超高分辩率显微镜技巧

为了更好地舆解性命进程和疾病产生机理，生物学研讨须要不雅察细胞内器官等细微构造的准确定位和散布，说明卵白等生物 分子若何构成细胞的根本构造，主要的活性因子若何调节细胞的重要性命运动等，而这些系统标准都在纳米量级，远远超越了惯例的光学显微镜（激光共聚焦显微镜等）的分辩极限。为懂得决性命科学研讨面对的这一难题，超高分辩率显微技巧应时而生，而且一经问世就获得了普遍的响应，2008年NatureMethods将这一技巧列为年度之最。

为了到达纳米量级的分辩率和极快速的成像，超高分辩率显微镜引入了很多冲破时期的立异技巧，懂得这些技巧将率领我们走入超高分辩率显微镜的奥妙世界。

3D-SIM(构造照明技巧)：

荧光样品经由过程分歧偏向和相位的光源照耀，而且在成像后应用特色的运算办法重构，发生冲破布儒斯特角衍射极限的超高分辩率图像。

•完整兼容现有荧光分子和荧光染料、不转变任何试验流程

•轴向分辩率进步到80-100nm，空间分辩率进步到激光共聚焦显微镜不雅察极限的8倍。

搭载3D-SIM技巧的DeltaVisionOMX超高分辩率显微镜已经胜利应用到了许多样品，好比微生物、脊椎动物细胞、组织切片甚至全部胚胎等。 进步的分辩率在判定和研讨亚细胞构造中成效明显，好比对微管和肌动卵白的不雅察中可以解析到单根微管纤维。

Monet(单分子成像与定位技巧)：

经由过程在极短时光内对单个或几个荧光分子的激发和获取发射光旌旗灯号，上千次获取后经由过程奇特算法重构图像，从而获得冲破百纳米极限的超高分辩率图像。这种技巧须要应用奇特的光敏卵白来做荧光染料，经由过程奇特的算法可以分辩衍射极限上重叠的荧光团地位。

•搭载PALM的DeltaVisionOMX实现了极短时光内的图像获取

•可以或许处置极 密度的图像，使高浓度标志的和更高激活能量的样品的成像酿成可能。

超高速成像：

研讨者对于成像速度进入"亚秒时期"的需求已经十分的急切。以往的速度瓶颈重要在曝光时光以及CCD成像时光，应用超亮度光源以及改良的新型拍照机， 进步了成像速度。

•DeltaVisionOMX可同时不雅察四个荧光通道。

•每个荧光通道的成像速度到达了前所未有的200帧/秒（512×512像素，5ms曝光）。

这种惊人的使细胞内超快速进程的不雅察成为可能。研讨人员可以或许在三维空间内追踪活细胞内的标志卵白，而分辩率接近分子程度。这意味着应用者可以开端答复新型的研讨问题，如细胞中的某些构造若何工作，它们若何互相感化，以及事宜连续多长时光。

超高分辩率显微镜问世以来，获得了研讨者的强烈响应，自2008年9月问世的佼佼者DeltaVisionOMX，已有几十台安装在哈佛医学院、耶鲁 学、MIT、冷泉港、牛津 学等世界研讨机构，赞助科研工作者取得一系列重 科研结果并揭橥在Nature、Cell、Science、Neuron等刊物上。好比加州 学戴维斯分校的Hsing-JienKung传授引导的生物光子学科学技巧中间（CBST）的生物医学科研人员最近应用这种对象初次对活的肿瘤细胞内部的纳米尺寸的区室的活动进行了成像。这些区室捕获细胞器和高分子从而供给给溶酶体，它们是一个称为自噬的细胞间收受接管进程的症结构成部门。Kung以为高分辩率、活细胞成像技巧的开辟可以让我们加速对这种难以捉摸的进程的懂得，为自噬调控剂的开辟摊平了途径。信任不久的未来，超高分辩率显微镜将会带来全部细胞生物学的革命。