显微镜 生物北京大学教授研制了超灵敏结构光超
作者: 发布时间:2022-07-02 17:42:27点击:1958
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用户1914998866 2018~0628 20:02
陈亮一的团队来自北京大学,谭珊的团队从华中科技大学发明了一种高度敏感的结构光的超高分辨率显微镜,Hessian的SIM卡。这个结果在线发表在全文的形式在自然生物技术(影响因子41.67)最近。本文的标题是很快的,长期的,以麻布结构照明显微镜高分辨成像。图1:海神结构光显微镜分析了囊泡融合孔形成的全过程。以上:实际动态过程分析如下:四从;从实验结果得到的囊泡融合状态。
当每秒获得188个超高分辨率图像时,HeISEN结构光显微镜的空间分辨率可达85纳米,并且可以区分单个头发的1 / 600至1 / 800尺寸结构。共聚焦显微镜照明所需的光照不到三个数量级,由于极低的光漂白和光毒性,在100 Hz超高分辨率成像下,通过连续采样10分钟可以获得180000个超高分辨率图像。或在1 Hz超高分辨率成像下连续1小时超高分辨率成像而不进行光漂白。
与获得2014年诺贝尔化学奖的受激辐射损失超高分辨率显微镜(STED)相比,海森结构光显微镜(HESM)在活细胞超高分辨率成像方面具有明显的优势,具有极高的时间分辨率和低的光毒性。例如,在观察囊泡和细胞质膜融合所释放的神经递质和激素的过程中,Heisen结构光显微镜和STED显微镜(分辨率60nm,大约每秒5幅;发表在2018年3月《武钢细胞》上的文章实验室)可以观察到融合形成的小泡,但是海森结构光显微镜分析四种不同的小泡融合中间状态,包括小泡开放、小泡塌陷、小泡维持和最终小泡-细胞质膜融合。囊泡形成的整个过程是可视化的(图1)。
2。在Heisen结构光显微镜下观察COS-7细胞内质网与线粒体的动态相互作用。蓝色线粒体用MitoTracker Green标记,嵴结构清晰。紫红色被标记为SEC61 Mc樱桃。
这一突破一方面是基于硬件独立设计的新型偏振旋转玻璃阵列、高精度的顺序控制程序和高数值孔径物镜的应用,另一方面是一种创新的重建算法。借鉴人眼识别信号和噪声的机理,提出生物样本在多维时空中是连续的、有噪声的,这是构造海森矩阵和完全随机分布的先验知识。D指导超高分辨率荧光图像的重建。
超灵敏海森结构光显微镜是活细胞最长时间分辨的超高分辨率显微镜。它适用于各种细胞和探针的荧光成像,可以说所有的扫描共焦显微镜方案都可以使用Heisen结构光显微镜,因此具有广泛的应用前景。
论文的作者是北京大学的黄小帅、华中科技大学的范俊超和北京大学的李柳菊。作者分别是北京大学陈亮一和华中科技大学谭珊,该研究得到自然科学基金(NSFC)重大仪器研究基金、重大科研项目、重点研究开发项目的支持。北京省自然科学基金委员会科技部、重点基础研究发展计划和重点项目的经费计划基金会,陈亮一、黄晓帅等创始成员参加了高分辨率小型化T的开发。双光子显微镜曾发表在《自然方法》杂志上,并于2017年荣获中国十大科技进步称号,今后将进一步实现海森结构光的显微体内成像。
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