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西城显微镜下用微小玻璃针挑出微量的白血球细胞实验

作者: 发布时间:2022-07-02 20:47:10点击:1201

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大家好,这里是老上光显微镜知识课堂,在这里你可以学到所有关于显微镜知识,好的,请看下面文章:显微镜下用微小玻璃针挑出微量

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显微镜下用微小玻璃针挑出微量的白血球细胞实验

DNA检品量过少,再经DNA萃取纯化后,检品DNA往往已漏失不见的困扰,
尽管PCR技术理论上应可将极微量的DNA做等比级数的扩大,但漏失不完整的、
甚至是完全漏失DNA的检品,就算是使用目前最受嘱目并广泛运用于人别鉴定的short tandem repeats(STR),
虽有其DNA长度较短、较容易PCR复制的优点,也常常无法得到完美的STR 基因座分型结果。

解决微量证物的DNA检出不良情形,曾实验以显微注射系统,
在显微镜下用特殊微小玻璃针挑出检品中微量的白血球细胞, 舍弃一般传统标准的DNA萃取方式,
利用热涨冷缩的原理将细胞DNA释放出来,经PE Applied Biosystems公司出品的STR AmpFlSTR Cofiler Kit试验,
其基因座包括D3S1358、D16S539、TH01、TPOX、 CSF1PO 、D7S820及可辨别性别的Amelogenin,
在初步的研究发现,在单一细胞PCR的Cofiler STR分型的实验中,大多数的基因座型别可被成功分型出来,
但也有些异合子(Heterozygous loci)基因座型别因优势的PCR复制产生基因型漏失或因复制不全导致基因型
增多等基因座型别失真的现象,幸运的是并非所有的单一细胞PCR皆会产生基因型漏失或基因型增多的失真现象,
所以多次重复做单一细胞PCR的分析将可得到较正确的结果,
单一细胞PCR Cofiler STR分型的实验中虽未能得到稳定的结果,但将此技术使用粒线体DNA的定序分型上,
却有明确及稳定的结果可供鉴定。另外将白血球细胞数提高至10至30个来进行Cofiler STR的微量细胞PCR分型,
所有的基因座型别皆可稳定正确的表现出来,建立在上述的研究基础上,
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