西城电子显微镜的缺点是成像需要较长的扫描时间

作者：发布时间：2022-07-02 20:39:51点击：777

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电子显微镜的缺点是成像需要较长的扫描时间

可以用于单分子检测的光学成像方法主要包括四种:近场扫描

光学显微镜(NSOM )、激光共聚焦扫描显微镜(CLSM)、广场落射式

荧光显微镜、全内反射荧光显微镜(TIRFM)

NSOM是在扫描探针显微镜基础上，结合光学探测方法而发展起来的，可以达到

SO- 100nm址级的超衍射的空间分辨率(比可见光的衍射极限高出5-10倍)。NSOM

与AFM的特点十分相似，都是样品近距离观测(sample proximity method)、应用扫

描探针、侧向分辨率高(10^-100nm)、只能检测固体分子等。另外，因为激发容积小，

它的信噪比很高。目前，NSOM已经应用到支持物或细胞膜上的单个荧光团成像、

波谱分析及FRET检测。虽然NSOM具有较高的分辨率，在单分子探测的研究中发挥了

很重要的作用，但是它也受一定的限制。例如，在扫描时需要通过复杂的控制系统来保

持样品与探针针尖之间适当的距离;由于光纤及其尖部的限制，输出光的强度有限，对

于50-100nm的输出能员只能在1^-50nW;探针针一尖的再生率非常低;镀铝的探

针针尖能影响荧光的发射寿命和强度，因为金属铝对分子的激发态有淬灭的作用。

CSLM的主要优点是能进行三维成像，信噪比较高，目前已经用于单分子FRET检测、

光谱分析、动力学检测等。它的主要缺点是成像需要较长的扫描时间。

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