西城荧光显微镜常识-荧光光谱的特点-光谱的形状
作者: 发布时间:2022-07-02 20:37:59点击:754
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荧光显微镜常识-荧光光谱的特点-光谱的形状
荧光光谱的特点
(1 )激发光谱和发射光谱的对称性。荧光的激发光谱与吸收光
谱的形状极为相似,并且呈镜像对称关系。这是因为荧光发射一般都
产生于激发单重态的更低振动能级在向基态各能级跃迁的过程中,
而吸收光谱产生于基态分子向激发单重态各振动能级跃迁的能量
吸收,由于在不同电子能级中不同振动能级之间的能量差相似,因此
出现这种对称关系,需要注意的是这种对应关系来源于能级差的类似,
因此要获得对称的谱图需要以能量(可以是频率或者是波数)作为横
轴。
(2 )斯托克斯位移(Stokes shift)
处于溶液状态的分子荧光中,发射荧光的波长通常要比其相应吸
收的光(激发光)波长要长,这种现象由斯托克斯于1852年观察
到。从能级图上可以看出,处于激发态的分子自身可以通过振动弛豫
损失部分能量,同时溶剂及体系中其他分子的弛豫现象会使其能量进
一步降低,因此发射光的能量会较激发光要低,发射光谱移向长波方
向。
(3 )荧光发射光谱的形状与激发光波长无关
一般情况下,使用不同波长的激发源激发荧光分子,可以获得形
状相同的荧光发射光谱。当荧光分子受激发时,无论其到达哪种激发
状态,都会通过振动弛豫及内转换等过程回到其分子激发态的最
低振动能级,荧光的发光则由该能级回到基态的各振动能级过程中发
出,该过程与激发光的波长无关。
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