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植物细胞内生细菌研究用荧光显微镜
荧光标记与报道基因技术的结合使用被证明是植物上细菌行为的一种有力的研究工
具。荧光报道基因和目的细菌基因的融合使得我们能够在.显微镜下在单细胞个体水平_L
测定细菌墓因的转录活性，而不是在群体水平上。因此，在特定环境下我们就能够测定
基因的转录活性的分布，由此可进一步了解篆因潜在表型所发挥的作用。
除非实验研究是在无菌条件下开展，否则还需要一个额外的标记基因来将研究细菌
对象与植物本身的内生细菌区分开来。额外标记的使川将确保由于所包含的目的基因转
录活性低甚至没有从而导致报道基因信号很低的细菌能够被检测出来。在该类研究
中，Brandl等人将脚基因与E. herbicola的生长素(IAA)合成基因融合在一起，用荧
光原位杂交(FISH)技术研究IAA合成在这种豆叶细菌E. herbicola种类中的分布
将含有GFP融合基因的转化￡. herbicola菌株接种在植物上，培养以使细菌
生长定植。然后，从叶片表面将细菌细胞漂洗下来，在显微镜玻片上用对E. herbicola特
异性的is甲基罗丹明标记的16S rRNA探针进行荧光原位杂交。对获得的荧光显微图像
进行数字分析来测定经FISH染成红色的细菌细胞所发出的绿色荧光强度。
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