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紫外光需要特殊的显微镜光学装置-光学仪器
继发现水母GFP之后，在其他物种中也发现了几个类似的发射光光谱为绿色区域
的FP (Matz et al. 1999).这些物种包括礁珊瑚、海葵、挠脚类动物(Masuda et al.
2006)和文吕鱼(Deheyn et al. 2007)。虽然天然GFP具有明亮的荧光和良好的耐光
性，但其双峰激发光谱(395nm)更高峰值处在紫外范围边界。而且，紫外光需要特殊
的显微镜光学装置，并在成像过程中损伤细胞。在早期的GFP基因突变研究中，Tsien
和同事发现了一个.单突变(S65T) (Heim et al. 1995)可以消除395nm的峰值，并把
更大的激发光波长转移到488nm。这种突变是GFP最普遍的一种变体，EGFP是目前
用得最多的GFP.同时，EGFP可使用常用的异硫佩酸荧光素(FITC)滤光
片进行成像，EGFP是目前GFP变休中亮度更大和光稳定性更好的GFP。这些特点使
得EGFP成为更受欢迎的FP和单标记荧光标记实验更好的选择。EGFP的缺点是
弱pH敏感性和轻微二聚化趋势。
客服1