西城细胞培养简介-移动细胞观察用倒置生物显微镜
作者: 发布时间:2022-07-02 20:54:58点击:1130
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细胞培养简介-移动细胞观察用倒置生物显微镜
细胞培养
所谓的体外细胞与组织培养,是指在活体外利用人工供给的养分与
环境來维持细胞的生命。体外细胞培养需瞭解细胞生长週期,培养液特
性,细胞解冻、分盘、及植入支架(Scaffold),及细胞计數,
以下就各项实验之目的加以說明:
●细胞解冻:冷冻细胞之活化原则为快速解冻,以避免冰晶重新结晶而
对细胞造成伤害,导致细胞之死亡。解冻的方法:
1. 自液态氮中取出冷冻管,立即放入 37°C 水槽中快速解冻。
2. 取出 0.9ml 解冻之细胞悬浮液,缓缓加入有培养基之 37°C培养容器内
(稀释比例为 1:10~1:15),混合均匀,放入 CO2 培养箱培养,待细胞贴附随即更换新鲜培养基,
另取 0.1ml 解冻细胞悬浮液作存活测试。
3. 若需去除冷冻保护剂,则将解冻之细胞悬浮液加入含有 5-10ml
培养基之離心管内,以 1,500 rpm, 離心 5 分钟,移去上清液,加
入新鲜培养基,混合均匀,放入 CO2 培养箱培养。
细胞活化后,约需數日或继代一至二代,细胞生长或特性表现才会
恢復正常﹙例如产生单株抗体或是其他蛋白质﹚,故解冻后的细胞需经
过培养后分盘始能做为实验用
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