（以下内容由中国显微图像网译制，转载请注明！） IupBmp=Ru `!, {

问题4：（接前三个问题）

Colleagues，

有个高内在筛选公司正在和我的上司接洽，他们要倾销一款带有共聚焦扫描功效的HCS。HCS仪器可以扫描多孔板和显微镜玻片，也能为活细胞供给情况前提，老板想知道这种仪器是否合适我们这些并没活细胞功效性研讨须要的初级共聚焦用户。

别的，我知道每个光学仪器的购置都有让步，有哪些让步是我们不消做的呢？似乎 多半HCS都合适干镜，一般NA都比拟低。

我尤其愿意听那些同时用过点扫描共聚焦和HCS的人谈谈经验！

Doug

答复1:

Hi Doug,

HCS可以用于对显微镜请求不高的工作，它的最 优势就是高通量，能让多个样本同时成像。

因为主动对焦的原因，一般采取低NA值的干镜。 多半厂商采取的反射定位会使镜头离多孔板的外面或玻片很近，但一般不会斟酌到样本的变更。对于厚的但不是太厚的样本，这不是问题。对于单层细胞，你将会有很 比例的掉焦图像。速度不快，成像基于主动对焦，共聚焦图像一般是在0.6NA干镜下拍得，要在有些倾斜的光学体系下获得清楚的图像照样须要一些光学技能的。

HCS有些奇异，所采集的图像被以为仅仅是中央数据，期待被整合进最后的测量。它有点像个读板器，你并不关怀它的样子，而更集中在每个孔的准确度和精准度。因为这些中央数据都是图像，很天然的要潜入里面看看是什幺。

我存眷的其他重点是软件，很多体系可以从玻片、多孔板中采图，但他们不会按你的期望去设计。这因分歧制作商而分歧，但因为集中在高速主动采图/高通量上，他们可能没有常用的把持杆和你认为很轻易的根本掌握机能。

这并不影响你从这些体系中获得很好地图像，更主要的是要知道衡量和想要的用处。

Casey Laris | DiPath Inc. | Twitter | Mobile: 858-829-9501

答复2：

Hi Doug,

假如你要买HCS共聚焦显微镜，就买BD pathway 855 HCS，请参考：

*Cabrera* O, Jacques-Silva MC, Berman DM, Fachado A, Echeverri F, Poo R,

Khan A, Kenyon NS, Ricordi C, Berggren PO, *Caicedo* A. Automated,

high-throughput assays for evaluation of human pancreatic islet function. </pubmed/18351020> Cell Transplant. 2008;16(10):1039-48. PMID: 18351020.

CARV碟片共聚焦，有两个Hg氙灯灯胆，可以做Fura-2 350/380nm激发比率试验，配有ORCA-ER相机，可以在宽场和共聚焦模式下不雅察。

George

答复3：

Hi Doug

HCS的长处：

整合了采图、剖析和数据治理才能

可以载入多孔板

可以对全部96孔板成像

HCS的缺陷：

与买通俗显微镜比拟，HCS价钱贵的惊人

灵巧性不强（如：没空间加其他相机）

有些不消激光，而是通俗光源，有时会随 功率波动

HCS体系的价钱足够买个配了共振扫描头的激光扫描共聚焦显微镜。如许，既有速度又有灵巧性。

Sylvie Le Guyader

Live Cell Imaging Unit

Dept of Biosciences and Nutrition

Karolinska Institutet

Novum

14183 Huddinge

Sweden

office: +46 (0) 8 5248 1107

LCI room: +46 (0) 8 5248 1172

mobile: +46 (0) 73 733 5008

更多出色答复，中国显微图像网推举：confocal HCS instruments - are they ready to occasionally replace a confocal microscope?

http://confocal-microscopy-list.588098.n2.nabble.com/confocal-HCS-instruments-are-they-ready-to-occasionally-replace-a-confocal-microscope-td7578440.html#a7578449