显微镜 英文相衬显微镜的介绍与说明
作者: 发布时间:2022-07-02 17:48:50点击:667
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相差显微镜,又称相差显微镜,是由荷兰科学家泽尼克于1935年发明的,用来观察未染色标本。在活细胞和未染色生物标本中,由于细胞的精细结构的折射率和厚度不同,波长也不同。而光波的振幅不变,只有相位变化(振幅差),这种振幅差不能被人眼观察到。相差显微镜和普通显微镜的区别在于用圆形孔径代替可变孔径,用带相位板的透镜代替普通物镜,以及提供组合轴的望远镜。德德。
不同之处在于同一光通过折射率不同的介质的相位不同。相位指的是光在某一时刻的位置。一般来说,因为被检测物体(如未染色的细胞)之间的差别太小而不能区分。用肉眼观察,只有在相位差变为幅度差(亮度差)后才能分辨出来。折射率和厚度乘积(即光路差)的关系。相差显微镜用来检测被检测物体的光路差。
诺贝尔奖是因相差显微镜、透射电子显微镜和扫描隧道电子显微镜在细胞生物学研究仪器中的设计或发明而获得的。
相差显微镜具有四个特殊结构:相差物镜、圆孔旋转聚光器、同轴望远镜和绿色滤光片。不同波长的照明光。
利用物体不同结构部件之间的折射率和厚度差,将物体不同部分的光程差转化为振幅(光强)差。观察显微镜是通过具有圆形孔径的聚光器和带有相位板的相位差物镜实现的,主要用于观察活细胞或未染色的组织切片,有时用于观察缺乏对比染色的样品。
通过试样的可见光的光程差变为振幅差,提高了各种结构的对比度,使结构清晰可见。Na光路,延迟1/4(波长)。如果进一步增加或减少1 / 4,光程差变为1/2。两个光合轴之间的相互干扰增强,振幅增大或减小,对比度增大。
1。环形光阑位于光源和集中器之间。它的作用是形成一个空心聚光锥通过聚光器并聚焦在样品上。
2。用氟化镁涂覆的相板可以将直接或衍射光的相位延迟1/4。
(1)A+板:直接光延迟14,两组光波在光轴叠加后,振幅增大,样品结构比周围介质更亮,形成明亮的对比度(或负对比度)。
(2)B+相位板:衍射光延迟14,两组光经同轴光波减去后,振幅减小,形成暗对比(或正对比),结构比周围介质更暗。
(1)当相位反转时,当获得NN或NN时,图像与阴影的对比度正好相反,称为相位反转,当相位差等于0时,图像与阴影的对比度是不可识别的。随着对比度的增加,相反转在继续增加到一定值时发生。对于90%高吸光度(高对比度)物镜,转变值约为0.55,对于70%标准吸光度,转变值约为0.33。区分较小的光程差。
(2)晕和衰落效应不是光的损失,而是由于相差显微镜成像的相位延迟而使结构变暗时,光在像面上的重新分布,所以在暗区消失的光会在较暗的物体周围产生明亮的光晕。相差显微镜的优点在于,当环形孔径很窄时,相差显微镜不利于细微结构的观察,使光晕变差。他也会减少。
(3)当观察到相位差时,样品的厚度应为5μm或更薄。当使用较厚的样品时,样品的上层是非常清楚的。较深的层会发生模糊,会发生相移干涉和光散射干涉。
(4)盖玻片和载玻片的影响样品必须用盖玻片覆盖,否则环形光阑的亮环和相板的暗环难以重合。IDE。当有划痕、厚度不均匀或凸起时,会出现明亮的环形偏斜和相位干涉。此外,如果玻璃太厚或太薄,环形孔径会变大或变小。
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