显微镜下的牙齿不同来源精子对卵胞浆内单精子

大家好，这里是老上光显微镜知识课堂，在这里你可以学到所有关于显微镜知识，好的，请看下面文章： 卵母细胞质内精子显微注射（ICSI）是一种辅助受精显微操作技术，通过该技术，精子被直接注射到卵母细胞的细胞质中。ICSI是治疗男性不育症的主要方法，广泛应用于严重少精子症、弱精子症、畸胎精子症和由经皮附睾精子抽吸术（PESA）和睾丸精子抽吸术（TESA）引起的梗阻性无精子症。影响ICSI结局的主要因素有技术因素和女性因素，但不同来源的精子对ICSI结局的影响尚不明确。辅助妊娠结局。
    
     1.1 2015年1月至2017年3月，在郑州大学第二附属医院生殖中心进行了584个周期的卵母细胞回收和移植，ICSI的症状是：（1）严重少精子症和无精子症；（2）不可逆阻塞性无精子症。（3）精子发生功能障碍（排除遗传缺陷）。（4）免疫性不育。（5）体外受精（IVF）失败。（6）精子顶体异常。（7）需要植入前遗传学检查。（8）前IVF的受精率低于30%或受精排除标准：（1）两侧染色体异常；（2）女性畸形、子宫内膜异位症或输卵管积水；（3）卵巢反应差，卵子数少于3.1.2）方法1.2.1采用本中心标准长程序对所有患者进行排卵诱导和排卵，在月经前黄体期皮下注射促性腺激素释放激素激动剂（GnRH-a，Tabijia）7天，然后降至0.05mgd，直至hCG日。子宫内膜厚度<5mm、促卵泡激素<5U/L、雌二醇<180pmol/L、黄体生成素<5U/L,根据患者自身情况启动促性腺激素促排卵、内分泌检查及阴道超微结构检查。并对其进行卵泡发育监测。测定2～3个主要卵泡直径，注射hCG 18mm后，超声引导下经后穹窿穿刺36h，经卵母细胞处理后，在培养箱中培养2～4h。用透明质酸酶去除卵母细胞周围的颗粒细胞，选择MII卵母细胞进行ICSI.1.2.3精子自慰和密度梯度离心处理。将处理后的精子置于37℃的孵化器中，用于ICSI.1.2.4 PESA精子提取和精子治疗当天，患者采取仰卧位，常规消毒毛巾，使用精索防止麻醉。麻醉成功后，患者接受带有5mL注射器的针头，预先吸入奎因1020约1mL，经皮进入附睾，以负压反复抽出注射器，并将混合物注射到培养皿中，显微镜下可发现精子。治疗结束后，将其置于37℃培养箱内进行ICSI.1.2.5TESA精子提取和治疗，患者采用相同的准备和麻醉方法，将睾丸固定在穿刺侧，经皮和垂直穿刺睾丸从穿刺部位穿刺，用穿刺器穿刺。用针将抽取的生精小管置于Petri培养皿中，在显微镜下研磨生精小管，寻找精子的用途，直接离心制备精子悬浮液，置于37摄氏度。供精子在37℃水浴中回温后，用梯度离心法进行处理。1.2.7ICSI后16～18小时进行受精、卵裂和胚胎移植。观察卵母细胞的受精情况。两个原核卵母细胞正常受精。在取卵后第3天，选择得分更高的1-3个胚胎进行移植，给予常规黄体支持。1.3评价临床妊娠率、受精率、卵裂率、优质胚胎率、胚胎着床率和流产率、卵丘。活体妊娠率{新鲜移植妊娠数+新鲜移植后冷冻胚胎复苏妊娠数，直至2017-07-31}{2015年1月至2017年3月新鲜卵母细胞回收周期数}比较不同来源精子IC结局优质胚胎：取自正常受精卵，受精后3天胚胎细胞数为7-9，碎片少于胚胎的10%。1.4用SPSS 21.0统计软件进行统计分析。定性数据用百分数表示。统计学分析采用卡方检验或Fisher法，经统计学处理，P<0.05。
    
     2.1根据精子来源，将患者分为射精组（392个周期）、PESA组（86个周期）、TESA组（68个周期）和精子捐献组（38个周期），射精组、PESA gr在女性年龄、男性年龄、不孕症和BMI方面无显著差异。射精组受精率高于PESA组（P=0.013）和TESA组（P=0.005），射精组的卵裂率高于TESA组（P=0.001）。3组间M－Ⅱ卵数、胚胎转移数和胚胎质量率（P＞0.05）见表2。
    
     2.3三组间胚胎着床率、临床妊娠率、流产率无显著差异（P>0.05），TESA组累计妊娠率低于PESA组（P=0.003）。
    
     2.4射精组和供体组的一般情况、受精率、卵裂率、胚胎着床率、临床妊娠率、流产率和累积妊娠率无显著差异(P>0.05)。
    
     ICSI技术的发展为越来越多的不育男性带来了福音，ICSI技术直接将精子注入卵母细胞质中，因此需要极低的精子数和活力，睾丸曲细精管是精子发生的部位。精子在睾丸中完成减数分裂，成为单倍体和受精卵形成纺锤体的必需父本中心体。父性效应影响受精、胚胎发育和最终临床妊娠。精子在附睾中进一步成熟，并获得移动、识别透明带和结合卵子的能力。
    
     严重少精子症、弱精子症和梗阻性无精子症可通过ICSI技术产生后代，不同来源的精子对ICSI辅助妊娠结局是否有影响，国内外尚无定论。射精组卵裂率高于PESA组和TESA组。原因可能是睾丸穿刺获得的精子成熟度低、精子浓度低、活力差、畸形率高、核浓缩不完全、染色体异常率高。精子有时需要在体外培养一段时间才能存活，其中大多数是微动精子，ICSI精子的选择和操作比较困难，卵子体外暴露时间较长，因此受精率和卵裂率有一定的影响。因此，本研究结果表明，各组间优质胚胎率无显著差异，表明PESA组和TESA组即使受精率稍低，也能获得满意的胚胎。端口。
    
     胚胎着床率和妊娠率是反映移植胚胎体内发育潜力的重要指标，TESA组胚胎着床率、临床妊娠率和分娩率均较低，但无显著性差异。纳鲁等。结果表明，射精组、PESA组和TESA组的临床妊娠率分别为41.4%、43.5%和36.2%。TESA组的临床妊娠率低于射精组和PESA组，其原因可能是TESTA组的周期和有限数据。结果表明，附睾精子妊娠率高（31.76%vs 22.66%），流产率低（11.11%vs 44.11%），PESA组的累积妊娠率高于TESA组，这可能与精子成熟度低有关。而新鲜胚胎移植与冷冻胚胎移植的临床妊娠率两组间无显著差异，优质胚胎移植率相似，因此，对于梗阻性无精子症患者，PESA可获得较好的实验室指标和辅助妊娠。结果：由于PESA和TESA病例很少，因此需要积累更多的数据来观察附睾和睾丸精子对ICSI结局的影响。
    
     关于ICSI妊娠结局的报道很少。供精子来源于精子库，在冷冻前需要更高质量的精液。研究表明，即使是严重的少精子症和弱精子症也不影响ICSI的结局。解冻后人密度小于3×109／L。结果表明，供体组和射精组具有相似的实验室指标和辅助妊娠结局。其原因可能是精子冷冻保存和复苏可增加精子DNA损伤、增加精子细胞质空泡、细胞核、细胞质膜萎缩或肿胀、细胞膜破裂。筛选作用，清除了大部分有缺陷的精子，但只有精力充沛、代谢旺盛的精子才能耐受冻融过程。因此，即使冷冻保存精子，ICSI也不影响妊娠结局。
    
     综上所述，ICSI联合供精子、重度少精症射精子、附睾精子和睾丸精子可达到相似的胚胎着床率和临床妊娠率。对于梗阻性无精子症患者，PESA确实是获得精子的有效方法；研究表明，不同来源的睾丸和附睾精子冷冻和解冻后的ICSI治疗可以达到相似的效果。因此，有必要进行冷冻附睾和睾丸穿刺以获得精子，不仅要保证取卵当天的精子供应，而且要减轻患者再次手术的创伤和痛苦。用于精子提取，以保持男性生育能力。
    
     由于本研究所包括的周期数目较少，而且结果可能存在偏差，因此需要更多的临床数据以进一步分析和随访，从而为临床实践提供更可靠的基础。
    
     资料来源：程兰兰、冯宗刚、马丽颖、Tan Li等。不同来源的精子对胞浆内精子显微注射辅助妊娠结局影响的研究{J}，中国实用妇产科学杂志，2018，9：1042-1046。
    
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